(no subject)
Dec. 19th, 2017 12:31 pm![[personal profile]](https://www.dreamwidth.org/img/silk/identity/user.png){kind=small}
aridmoorsНу все, они меня бесят. Сил моих нет.
Короче, я работаю с нервными стволовыми клетками. И у них есть какая-то странная особенность, про которую ничего нет в литературе. Ну мало ли чего в литературе нет... ну в общем, короче, они обрастают какими-то соплями. И для меня это огромная проблема.
Не в смысле соплями, там, заразными бактериями или грибками или чем-то таким плохим, нет. Они обрастают соплями, которые они сами производят и секретируют вовне себя! И потом они друг с другом этими соплями связываются! И это капец какая проблема, потому что эти сопли не разрушаются трипсином, и в итоге я после нескольких пересадок клеток из тарелки в тарелку оказываюсь один на один с такой длииииииииной нитью-соплей, на которой, как бусины, висят все мои клетки!!! И их хрен оттуда сколупаешь! То есть они оказываются связаны друг с другом, и при этом, сволочи, округляются, и висят на этой сопле как длинные бусы. И что самое главное, продолжают размножаться! И даже еще сильнее, чем когда они были распластаны по тарелке.
Почему я говорю, что это сопли - потому что я пробовала такие клетки собирать и, например, готовить из них сэмпл для вестерн блота. И когда я туда складываю SDS, они становятся не просто вязкими, а МЕГА-вязкими. И даже просто если их пипетить вверх-вниз, они вязкие, как сопли. Более того - и что меня бесит больше всего, и из-за чего я собственно весь пост-то начала - это что когда их центрифугируешь, они не падают вниз! Эти сволочные сопли легче стандартных жидкостей, и они держат клетки, на них повисшие, на поверхности! И даже если центрифугировать долго, то все клетки вроде собираются внизу, но наиболее "сопливые" торчат таким облаком над ними. И короче когда пытаешься высосать жидкость лишнюю, ТО БЛИН ВСЁ ЦЕПЛЯЕТСЯ, и все клетки высасываются нафиг!!! И я остаюсь как дура без сэмпла. И всё из-за этих соплей.
Эти сопли можно уничтожить. Когда такие клетки собрать, засунуть в CELL BANKER и заморозить в -80, а потом на следующий день достать, соплей больше нет, и те же самые клетки спокойно ложатся на дно тарелки, приклеиваются и растут как нормальные клетки. Но уже на следющий день начинааааается. Сначала немножко соплей. Потом еще. Потом еще. И в конце концов у меня опять эти сопливые бусы вместо клеток.
И короче знаете чё? Я сначала думала, что это я при трипсинировании плохо разъединяю клетки, надо побольше их пипеть вверх-вниз, чтоб разъединить все. Так они прикиньте что? Они из-за этого ещё больше соплями обрастают. Реальная закономерность. Чем больше их разбулькаешь (там прям цвет медиума меняется, из-за того что много воздуха набулькивается в результате) - тем сопливее они будут, когда их высадишь в тарелку. Один раз я сильно-сильно набулькала, так они вообще почти не приклеились к тарелке, я пришла и обнаружила, что они уже все на этих соплях плавают, округлившиеся, и не ложатся на дно.
Они меня забесили. Главное, меня раздражает, что я не знаю, что это такое! Что хрень, WTF вообще?
Короче всё. Я соберу эти бусы, соберу клетки после разморозки, пробегу их на CBB и - если дай бог обнаружится разница - я ее вырежу и отправлю на масспек. Я так больше жить не могу. Что за сопли-то!?
Если у кого еще есть идеи или гипотезы насчет этих соплей, давайте, я буду всё проверять. Они меня выбесили, я теперь не успокоюсь, пока не выясню, что за сопли.
Короче, я работаю с нервными стволовыми клетками. И у них есть какая-то странная особенность, про которую ничего нет в литературе. Ну мало ли чего в литературе нет... ну в общем, короче, они обрастают какими-то соплями. И для меня это огромная проблема.
Не в смысле соплями, там, заразными бактериями или грибками или чем-то таким плохим, нет. Они обрастают соплями, которые они сами производят и секретируют вовне себя! И потом они друг с другом этими соплями связываются! И это капец какая проблема, потому что эти сопли не разрушаются трипсином, и в итоге я после нескольких пересадок клеток из тарелки в тарелку оказываюсь один на один с такой длииииииииной нитью-соплей, на которой, как бусины, висят все мои клетки!!! И их хрен оттуда сколупаешь! То есть они оказываются связаны друг с другом, и при этом, сволочи, округляются, и висят на этой сопле как длинные бусы. И что самое главное, продолжают размножаться! И даже еще сильнее, чем когда они были распластаны по тарелке.
Почему я говорю, что это сопли - потому что я пробовала такие клетки собирать и, например, готовить из них сэмпл для вестерн блота. И когда я туда складываю SDS, они становятся не просто вязкими, а МЕГА-вязкими. И даже просто если их пипетить вверх-вниз, они вязкие, как сопли. Более того - и что меня бесит больше всего, и из-за чего я собственно весь пост-то начала - это что когда их центрифугируешь, они не падают вниз! Эти сволочные сопли легче стандартных жидкостей, и они держат клетки, на них повисшие, на поверхности! И даже если центрифугировать долго, то все клетки вроде собираются внизу, но наиболее "сопливые" торчат таким облаком над ними. И короче когда пытаешься высосать жидкость лишнюю, ТО БЛИН ВСЁ ЦЕПЛЯЕТСЯ, и все клетки высасываются нафиг!!! И я остаюсь как дура без сэмпла. И всё из-за этих соплей.
Эти сопли можно уничтожить. Когда такие клетки собрать, засунуть в CELL BANKER и заморозить в -80, а потом на следующий день достать, соплей больше нет, и те же самые клетки спокойно ложатся на дно тарелки, приклеиваются и растут как нормальные клетки. Но уже на следющий день начинааааается. Сначала немножко соплей. Потом еще. Потом еще. И в конце концов у меня опять эти сопливые бусы вместо клеток.
И короче знаете чё? Я сначала думала, что это я при трипсинировании плохо разъединяю клетки, надо побольше их пипеть вверх-вниз, чтоб разъединить все. Так они прикиньте что? Они из-за этого ещё больше соплями обрастают. Реальная закономерность. Чем больше их разбулькаешь (там прям цвет медиума меняется, из-за того что много воздуха набулькивается в результате) - тем сопливее они будут, когда их высадишь в тарелку. Один раз я сильно-сильно набулькала, так они вообще почти не приклеились к тарелке, я пришла и обнаружила, что они уже все на этих соплях плавают, округлившиеся, и не ложатся на дно.
Они меня забесили. Главное, меня раздражает, что я не знаю, что это такое! Что хрень, WTF вообще?
Короче всё. Я соберу эти бусы, соберу клетки после разморозки, пробегу их на CBB и - если дай бог обнаружится разница - я ее вырежу и отправлю на масспек. Я так больше жить не могу. Что за сопли-то!?
Если у кого еще есть идеи или гипотезы насчет этих соплей, давайте, я буду всё проверять. Они меня выбесили, я теперь не успокоюсь, пока не выясню, что за сопли.
