(no subject)
Feb. 17th, 2014 11:13 am![[personal profile]](https://www.dreamwidth.org/img/silk/identity/user.png){kind=small}
aridmoorsЯ протестила: silica column из одного кита (для gel extraction) может быть заменена на колонну из другого кита (pcr purification kit), причем даже если киты из разных компаний.
Тока надо centrifugation speed и buffer amounts делать для той колонны, которую используешь. А то сэмпл теряется.
Вообще я открываю для себя мир биохимии на коленке. Потому что у нас кончились деньги. То есть, совсем. Вообще. До апреля. Поэтому все, что можно было раньше делать через наборчики, готовые реактивы, все это невозможно. Я закопалась в литру, и нашла там столько интересного! Что даже мой ассошиэйт профессор смотрит круглыми глазами - оказывается, вон как еще можно изголяться... Раскопали с ним старые завалы реактивов, которые даже он не помнит, что у нас были (хотя он в этой лабе 10 лет уже).
Не, определенно мне нравятся конструкторы. Собирать на коленке. Хочу двигаться в сторону биохимии и жосткого генетического инженеринга.
Тока надо centrifugation speed и buffer amounts делать для той колонны, которую используешь. А то сэмпл теряется.
Вообще я открываю для себя мир биохимии на коленке. Потому что у нас кончились деньги. То есть, совсем. Вообще. До апреля. Поэтому все, что можно было раньше делать через наборчики, готовые реактивы, все это невозможно. Я закопалась в литру, и нашла там столько интересного! Что даже мой ассошиэйт профессор смотрит круглыми глазами - оказывается, вон как еще можно изголяться... Раскопали с ним старые завалы реактивов, которые даже он не помнит, что у нас были (хотя он в этой лабе 10 лет уже).
Не, определенно мне нравятся конструкторы. Собирать на коленке. Хочу двигаться в сторону биохимии и жосткого генетического инженеринга.
![[identity profile]](https://www.dreamwidth.org/img/silk/identity/openid.png){kind=small}
no subject
Date: 2014-02-17 03:12 am (UTC)Я как-то пробовала выделять плазмиды старым добрым минипрепом до получения осветленного лизата, а потом переносить его в колонки из кита. Выход оказался очень низким по сравнению что с обычным высаживанием спиртом, что с китом, если полностью идти по протоколу. Так что да, есть тут какая-то хитрость.
Полагаю, что для выделения из геля тоже существуют исходные протоколы, дающие вполне приличный выход.
no subject
Date: 2014-02-17 04:20 am (UTC)А садить на колонны лизат я тоже пробовала, но purity как-то совсем хреновая получается. Да, что-то они туда сыпят, не иначе. Скорее всего они там подгоняют концентрации буферов и свойства мембраны так, чтобы тока с их реагентами ДНК привязывалась к колонее. Ну типа чтоб конкурирующие фирмы не могли конкурировать.
а минипреп руками я все-таки не люблю, и противно, и вредно, и все равно потом ДНК чистить надо.
no subject
Date: 2014-02-17 03:44 am (UTC)